MDA的研究方法

MDA采用不同濃度MDA體外干預(yù)大鼠肝線粒體，氧電極法檢測線粒體呼吸控制率（RCR）、磷氧比（P/O），測定呼吸鏈復(fù)合物及α-酮戊二酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶、蘋果酸脫氫酶活性.結(jié)果:線粒體經(jīng)MDA作用后，以蘋果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物，線粒體兩條呼吸途徑對MDA呈現(xiàn)不同的耐受力，前者在MDA100μmol/L時RCR顯著降低（P<0.05），400μmol/L時P/O降低（P<0.05）；后者MDA濃度達到400和800μmol/L時，線粒體P/O及RCR值顯著降低（P<0.05）。丙酮酸脫氫酶及α-酮戊二酸脫氫酶分別在50μmol/L和100μmol/L時活性下降（P<0.05），而MDA濃度達到1mmol/L時，蘋果酸脫氫酶活性降低（P<0.05）。呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ分別在MDA400和800μmol/L時最大反應(yīng)速度（Vm）降低（P<0.05），但MDA（0～3.2 mmol/L）對呼吸鏈復(fù)合物Ⅲ、Ⅳ的Vm及米氏常數(shù)（Km）沒有影響。結(jié)論：MDA對線粒體呼吸鏈及α-酮戊二酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶、蘋果酸脫氫酶存在不同程度的損傷作用，不同酶對MDA損傷的敏感程度有所差異，本研究中相關(guān)酶受MDA損傷的次序可能是：丙酮酸脫氫酶、α-酮戊二酸脫氫酶、呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ、蘋果酸脫氫酶、呼吸鏈復(fù)合物Ⅲ、Ⅳ.

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